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ADC热稳定性如何评价?
时间:2022-08-04 16:08 点击次数:30

差示扫描量热分析(Differential Scanning Calorimetry,简称DSC),是在过程控制温度下,测量输入到试样和参比物的能量差随温度或时间变化的一种免标记(label-free)技术。通过这些测量,可以表征蛋白质结构稳定性以及特异性或非特异性蛋白质-配体结合,并定义了各结构域的稳定性及其相互作用。仪器测试原理根据测量方式的不同,差式扫描热仪一般可以分为两种:功率补偿型和热流型,两者最大的区别在于结构设计的原理不同。

功率补偿型DSC的原理功率补偿型差示扫描量热法是采用零点平衡原理。该类仪器包括外加热功率补偿差示扫描量热计和内加热功率补偿差示扫描量热计两种。外加热功率补偿差示扫描量热计的主要特点是试样和参比物仍放在外加热炉内加热的同时,都附加有具有独立的小加热器和传感器,即在试样和参比物容器下各装有一组赛贝克(Seeback)热电装置。整个仪器由两个控制系统进行监控,其中一个控制温度,使试样和参比物在预定速率下升温或降温,另一个控制系统用于补偿试样和参比物之间所产生的温差,即当试样由于热反应而出现温差时,通过补偿控制系统使流入补偿热电传感器的电流发生变化。

例如当试样吸热时,补偿系统流入试样侧加热器的电流增大;试样放热时,补偿系统流入参比物侧加热丝的电流增大,直至试样和参比物二者热量平衡,温差消失。这就是所谓零点平衡原理。




功率补偿型差示扫描量热法原理S—试样;R—参比物;1—温度敏感元件;2—加热器

热流型DSC的原理热流型差示扫描量热法主要通过测量加热过程中试样吸收或放出热量的流量来达到DSC分析的目的,有热反应时试样和参比物仍存在温度差。该法包括热流式和热通量式,两者都是采用差热分析的原理来进行量热分析。热流式差示扫描量热仪的构造与差热分析仪相近,它利用康铜电热片作试样和参比物支架底盘并兼作测温热电偶,该电热片与试样和参比物底盘下面的镍铬丝和镍铝丝组成热电偶以检测差示热流。

当加热器在程序控制单元控制下加热时,热量通过加热块对试样和参比物均匀加热。由于在高温时试样和周围环境的温差较大,热量的损失较大。因此在等速升温的同时,仪器自动改变差示放大器的放大系数,温度升高时,放大系数增大,以补偿因温度变化对试样热效应测量的影响。

基本应用差示扫描量热仪的基本应用包括:材料的熔点测定、热历史研究、结晶度测定、油和蜡的热分析、固化转变、原材料分析、玻璃化转变温度的测量、结晶温度测量、粘流转变温度测量、氧化诱导时间测量、比热测量、等温结晶及等温动力学研究、纯度测量等,广泛应用于材料、生物、食品、医药、临床、冶金、地质、矿产、航空航天、石化、军事考古等领域。

在生物医药领域,差示扫描量热技术(DSC)常用来评价重组蛋白药物也包含抗体偶连药物(ADC)。例如在对热稳定性的评估分析手段上,DSC是目前最常用的测量蛋白质热稳定性的方法,不仅可以得到变性温度,还可以得到蛋白质变性的焓、熵和自由能等信息。

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